苯酚含量测定

1　试剂

1.1　0.02mol/L溴液

取0.56g溴酸钾，加3g溴化钾，加蒸馏水溶解成1000ml。

1.225%碘化钾溶液

取碘化钾25g，加蒸馏水溶解成100ml。

1.3　标准0.02mol/L硫代硫酸钠溶液

取标准0.1mol/L硫代硫酸钠溶液准确稀释5倍。

1.46　mol/L盐酸溶液

1.5　淀粉指示剂

取可溶性淀粉0.5g，加蒸馏水5ml，搅匀后，缓缓倾入100ml的沸水中，随加随搅拌，煮沸，至适成稀薄的半透明液，放置，俟沉淀，倾取上层清液（配制时可加适当的防腐剂）。

1.60.17　mol/L硫酸锌溶液

取硫酸锌5g加蒸馏水溶解成100ml。

1.7　饱和氢氧化钡溶液

取氢氧化钡[Ba(OH)2·8H2O]5.6g，加蒸馏水溶解成100ml。

1.8　0.5%酚酞指示剂

取酚酞0.5g，加乙醇100ml,使溶解即得。

2　操作

2.1　菌苗类样品

精确量取样品1ml于碘瓶中，加入蒸馏水约50ml，精确加入0.02mol/L溴液15～25ml（样品含苯酚量0.3%～0.5%加25ml，小于0.3%则加15ml），沿瓶壁加入盐酸（6mol/L）10ml，摇匀，密塞，在暗处置30分钟后，加25%碘化钾2ml于碘瓶颈口，稍启瓶塞，使流下，密塞，摇匀。以少量蒸馏水洗瓶颈，用标准0.02mol/L硫代硫酸钠溶液滴定至溶液呈浅黄色，加淀粉指示剂约0.5ml，滴定至蓝色消失。同时做空白试验。

2.2　人胎盘血丙种球蛋白及疫苗类样品

精密量取除蛋白（方法同蛋白含量测定钨酸除蛋白法）后滤液5ml于碘瓶中，其余操作同2.1项。

2.3　人胎盘组织液

精确量取样品5ml于50ml容量瓶内，加适量蒸馏水，加0.5%酚酞指示剂2滴，加5%硫酸锌溶液2ml，饱和氢氧化钡溶液约2.5ml（加至溶液呈粉红色），加蒸馏水稀释至刻度，摇匀，放置30分钟，过滤。精确量取滤液5ml于碘瓶中，其余操作同2.1项。

3　计算

3.1　菌苗类样品

苯酚含量%（g/ml）=（空白滴定数-样品滴定数）×硫代硫酸钠mol/L×1.569

3.2　人胎盘血丙种球蛋白（或人胎盘组织液）及疫苗类样品

苯酚含量%（g/ml）=（空白滴定数-样品滴定数）×硫代硫酸钠mol/L×1.569×2

附注

1.蛋白类制品由于除蛋白后滤液仍含有小分子物质，对苯酚含量测定有干扰，使结果偏高，边缘制品可用蒸馏法，取除蛋白滤液5ml于凯氏蒸馏器内，接受液为0.02mol/L溴液15～25ml，蒸馏约20分钟后其余操作同上。

2.可做限度测定。