枸橼酸离子含量测定

1　试剂

1.1　标准枸橼酸钠浓溶液

精确称取枸橼酸钠(Na3C6H标准5O7·2H2O)0.5882g,加蒸馏水溶解，并准确稀释至100ml　，为20mmol/L　枸橼酸钠液。

1.2　标准枸橼酸钠溶液

精密量取标准枸橼酸钠浓溶液5ml，用5%三氯醋酸准确稀释至50ml，为2mmol/L枸橼酸钠标准液。

1.310%三氯醋酸：称取三氯醋酸10g，用蒸馏水稀释至100ml。

1.45%三氯醋酸：称取三氯醋酸5g，用蒸馏水稀释至100ml。

1.5　砒啶(A·R)。

1.6　醋酸酐(A·R)。

2　操作

2.1　样品

精确量取0.5ml样品，加　4.5ml　蒸馏水，加5ml10%三氯醋酸，混匀，置60℃水浴　5分钟，离心去沉淀。精确量取1ml上清液于25ml玻塞试管中，加1.3ml吡啶，混匀，加5.7ml　醋酸酐，立即混匀并置于31℃水浴，准确培育35分钟后，于　425nm波长下测　OD值，同时做空白试验：取1ml　5%三氯醋酸代替1ml去蛋白后样品上清液，其余操作同样品。

2.2　标准曲线

精确量取标准枸橼酸钠溶液0.0、0.25、0.50、0.75、1.0ml,分别加5%三氯醋酸1.0、0.75、0.5、0.25、0.0ml　（其相应的枸橼酸钠离子含量为0、0.5、1.0、1.5、2.0mmol/l　），其余操作从加1.3ml吡啶开始同样品。可得一标准曲线。

3　计算

由标准曲线查得样品稀释液相当标准枸橼酸离子Ammol/L。

样品枸橼酸离子含量(mmol/L)=A×20